यदि IFA सकारात्मक है और इम्युनोब्लॉट अपरिभाषित है। इम्युनोब्लॉट - यह क्या है? संक्रामक रोगों के निदान में इम्यूनोब्लॉट

रोगी के रक्त सीरम को प्लेट के कुएं में पेश किया जाता है, जिसकी दीवारों पर एचआईवी प्रोटीन के टुकड़े या टुकड़े जुड़े होते हैं। ये प्रोटीन परीक्षण सीरम में एचआईवी के लिए एंटीबॉडी के साथ दृढ़ता से बातचीत करते हैं, यदि कोई हो। इसके अलावा, एक एंजाइम रोगी के सीरम से "पकड़े गए" एचआईवी एंटीबॉडी के प्रत्येक अणु से जुड़ा होता है, जो इन एंटीबॉडी को कुएं में समाधान के रंग को बदलकर दिखाई देता है: सीरम में जितने अधिक एंटीबॉडी होते हैं, प्लेट में रंग उतना ही गहरा होता है। इस क्षण से, एक सकारात्मक परिणाम की पुष्टि करने की प्रक्रिया शुरू होती है। पहले चरण में, इस सीरम के अध्ययन को दो कुओं में एक ही परीक्षण प्रणाली में दोहराया जाता है - यह तकनीकी त्रुटियों को समाप्त करता है। यदि परिणाम की पुष्टि की जाती है, तो दूसरा चरण शुरू होता है। अध्ययन दो अन्य एलिसा परीक्षण प्रणालियों में आयोजित किया गया है, "स्क्रीनिंग आउट" गलत-सकारात्मक परिणाम। यदि इनमें से कम से कम एक परीक्षण प्रणाली में एक सकारात्मक परिणाम प्राप्त होता है, तो अत्यधिक विशिष्ट का तीसरा चरण इम्युनोब्लॉट विधि - एचआईवी संक्रमण की उपस्थिति की पुष्टि करने वाला एक परीक्षण।

चूंकि अध्ययन चरणों में किया जाता है, परिणाम प्राप्त होने तक का समय 1 से 10 दिनों तक हो सकता है।

परिणामों के लिए विकल्प:

"इम्युनोब्लॉट नकारात्मक है" - इसका मतलब है कि एलिसा परीक्षणों में सकारात्मक प्रतिक्रिया झूठी या निरर्थक थी, कोई एचआईवी संक्रमण नहीं है।
"इम्युनोब्लॉट सकारात्मक है" - रक्त में एचआईवी के खिलाफ एंटीबॉडी का पता लगाया गया था, चौथे और अंतिम चरण की आवश्यकता है - एंटी-एड्स केंद्र में एक पहचान दस्तावेज (पासपोर्ट) के साथ बार-बार रक्त का नमूना लेना और रक्त के नमूने में तकनीकी त्रुटि को बाहर करने के लिए बार-बार परीक्षा। दोहराया सीरम पर सकारात्मक परिणाम के बाद ही अंतिम परिणाम को अभिव्यक्त किया जाता है - "एचआईवी में एंटीबॉडी का पता लगाया जाता है", एक व्यक्ति में - एचआईवी संक्रमण।
"इम्युनोब्लॉट संदिग्ध है"। इसका मतलब यह है कि सीरम सभी के साथ प्रतिक्रिया नहीं करता है, लेकिन कुछ व्यक्तिगत एचआईवी प्रोटीन के साथ, धब्बा के नाइट्रोसेल्युलोज स्ट्रिप्स पर लागू होता है, अर्थात एचआईवी प्रोटीन के एंटीबॉडी का केवल एक भाग का पता लगाया जाता है। अनिश्चित परिणाम का मतलब हो सकता है कि एक व्यक्ति एचआईवी से संक्रमित है, लेकिन शरीर द्वारा एंटीबॉडी का पूरा स्पेक्ट्रम विकसित नहीं किया गया है। अक्सर संदिग्ध परिणाम प्राप्त करने के क्षण से 1-3-6 महीने के बाद, सभी एंटीबॉडी और एचआईवी सीरम में एक के बाद एक दिखाई देते हैं। इस मामले में, संदिग्ध परिणाम एचआईवी संक्रमण के प्रारंभिक चरण का सबूत है। या, एक अनिश्चित इम्युनोब्लॉट के परिणाम से पता चलता है कि एक व्यक्ति संक्रमित नहीं है, लेकिन उसके शरीर में एचआईवी के लिए सच्चे एंटीबॉडी के समान एंटीबॉडी हैं। ऐसा परिणाम गर्भवती महिलाओं में तपेदिक, कैंसर रोगियों, कई रक्त आधान (रक्त आधान) प्राप्त करने वाले रोगियों में हो सकता है। यदि आईबी परिणाम अनिश्चित है, तो रोगी एक संक्रामक रोग विशेषज्ञ की देखरेख में है और विश्लेषण को दोहराता है।

एड्स और संक्रामक रोगों की रोकथाम और नियंत्रण के लिए खांटी-मानसीस्क केंद्र में परीक्षण पास करना, रूसी नागरिकों को परीक्षण से पहले और बाद में दोनों के बाद संक्रामक विशेषज्ञों और मनोवैज्ञानिकों से पूर्ण परामर्श प्राप्त करने के लिए एचआईवी गुमनाम और नि: शुल्क परीक्षण किया जाना है।

एक विधि है जो आपको एचआईवी वायरस के लिए एंटीबॉडी का निर्धारण करने की अनुमति नहीं देती है, लेकिन शरीर में वायरस ही, यह पीसीआर की विधि है - पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन। इसने अपनी प्रभावशीलता सिद्ध की है और इसका उपयोग किया जाता है:

इम्युनोब्लॉट के अस्पष्ट परिणाम के साथ "विंडो अवधि" में स्वयं एचआईवी की उपस्थिति या अनुपस्थिति का निर्धारण;

उपचार निर्धारित करने और उपचार की निगरानी के लिए आवश्यकता का निर्धारण करने के लिए;

एचआईवी संक्रमित माताओं से जन्म लेने वाले नवजात शिशुओं की एचआईवी स्थिति निर्धारित करने के लिए।

पीसीआर आपको संक्रमित सामग्री में वायरल कणों की बहुत कम मात्रा निर्धारित करने की अनुमति देता है। पीसीआर को परिष्कृत प्रयोगशाला उपकरणों और उच्च योग्य विशेषज्ञों की आवश्यकता होती है। विधि बहुत महंगी है और एचआईवी के लिए बड़े पैमाने पर परीक्षण में, जो कानून के अनुसार, आबादी के लिए मुफ्त में किया जाता है, लागू नहीं होता है।

आपातकालीन स्थितियों में (बच्चे के जन्म के दौरान, महत्वपूर्ण संकेतों के लिए ऑपरेशन), "एक्सप्रेस परीक्षण" का उपयोग किया जाता है। उनके कार्यान्वयन में परिष्कृत उपकरणों और उच्च योग्य कर्मियों की आवश्यकता नहीं होती है। तेजी से परीक्षा परिणाम की पुष्टि मानक एचआईवी परीक्षण द्वारा की जानी चाहिए।

immunoblot (पश्चिमी धब्बा) - विधि प्रयोगशाला अनुसंधान एचआईवी के लिए एंटीबॉडी की उपस्थिति के लिए रक्त सीरम; यह एलिसा की तुलना में अधिक सटीक विश्लेषण है और एलिसा परिणामों की पुष्टि करने के लिए उपयोग किया जाता है। IFA - एंजाइम इम्यूनोएसे (एलिसा) रक्त में एचआईवी एंटीबॉडी की उपस्थिति का निर्धारण करने के लिए प्रयोगशाला परीक्षण; एचआईवी एंटीबॉडी परीक्षण।

डब्ल्यूएचओ की सिफारिशों के अनुसार, एक अतिरिक्त विशेषज्ञ विधि के रूप में एचआईवी संक्रमण के निदान में इम्युनोब्लॉटिंग (पश्चिमी धब्बा) का उपयोग किया जाता है, जिसे एलिसा के परिणामों की पुष्टि करनी चाहिए। आमतौर पर, यह विधि एलिसा के साथ एक सकारात्मक परिणाम को दोगुना करेगी, क्योंकि इसे अधिक संवेदनशील और विशिष्ट माना जाता है, हालांकि अधिक जटिल और महंगी है।

प्रतिरक्षा सोख्ता एक जेल में वायरल प्रोटीन के प्रारंभिक इलेक्ट्रोफोरेटिक पृथक्करण और एक नाइट्रोसेल्यूलोज झिल्ली में उनके स्थानांतरण के साथ एंजाइम-लिंक्ड इम्युनोसोर्बेंट परख (एलिसा) को जोड़ती है। इम्युनोब्लॉट प्रक्रिया में कई चरण होते हैं ()। सबसे पहले, एचआईवी को शुद्ध और इसके घटक घटकों को नष्ट कर दिया गया है, इलेक्ट्रोफोरेसिस से गुजरता है, जबकि वायरस बनाने वाले सभी एंटीजन आणविक भार से अलग हो जाते हैं। फिर, ब्लोटिंग करके, एंटीजन को जेल से नाइट्रोसेल्यूलोज या नायलॉन फिल्टर की एक पट्टी में स्थानांतरित किया जाता है, जिसमें अब से एक प्रोटीन स्पेक्ट्रम होता है जो आंख को दिखाई नहीं देता है, जो एचआईवी के लिए विशिष्ट है। अगला, परीक्षण सामग्री पट्टी (सीरम, रोगी के रक्त प्लाज्मा, आदि) पर लागू होती है, और यदि नमूने में विशिष्ट एंटीबॉडी हैं, तो वे एंटीजन प्रोटीन की स्ट्रिप्स से बंधते हैं जो उनके लिए सख्ती से मेल खाती हैं। बाद के जोड़तोड़ (एलिसा की तरह) के परिणामस्वरूप, इस बातचीत का परिणाम कल्पना - दृश्यमान बना है। पट्टी के कुछ वर्गों में बैंड की उपस्थिति अध्ययन किए गए सीरम में एचआईवी एंटीजन को सख्ती से परिभाषित करने के लिए एंटीबॉडी की उपस्थिति की पुष्टि करती है।

एचआईवी संक्रमण के निदान की पुष्टि करने के लिए इम्यून ब्लोटिंग का सबसे अधिक उपयोग किया जाता है। डब्ल्यूएचओ सकारात्मक को सेरा मानता है जिसमें किसी भी दो एचआईवी लिफाफा प्रोटीनों के लिए प्रतिरक्षा सोखने की विधि द्वारा एंटीबॉडी का पता लगाया जाता है। इन सिफारिशों के अनुसार, यदि अन्य प्रोटीनों के साथ संयोजन में या बिना प्रतिक्रिया के केवल एक लिफ़ाफ़ा प्रोटीन (gp160, gp120, gp41) के साथ प्रतिक्रिया होती है, तो परिणाम को संदिग्ध माना जाता है और किसी अन्य कंपनी से या किसी अन्य कंपनी से किट का उपयोग करके फिर से जांच की सिफारिश की जाती है। यदि इसके बाद भी परिणाम संदिग्ध रहता है, तो पढ़ाई हर 3 महीने में जारी रहती है।

पहले चरण में इम्युनोब्लॉटिंग के लिए, रक्त सीरम में निहित प्रोटीन एक आणविक भार और एक विद्युत क्षेत्र (जेल वैद्युतकणसंचलन) का उपयोग करके चार्ज के अनुसार एक जेल में अलग हो जाते हैं। फिर, एक नाइट्रोसेल्यूलोज या नायलॉन झिल्ली जेल पर लागू होता है और "धब्बा" (यह धब्बा है)। यह एक विशेष कक्ष में किया जाता है, जो जेल से झिल्ली तक सामग्री के पूर्ण हस्तांतरण की अनुमति देता है। नतीजतन, प्रोटीन की उस स्थान की तस्वीर जो जेल पर थी, झिल्ली (धब्बा) पर पुन: पेश की जाती है, जिसे फिर आसानी से हेरफेर किया जा सकता है। प्रारंभ में, झिल्ली को वांछित प्रतिजन के एंटीबॉडी के साथ इलाज किया जाता है, और अनबाउंड सामग्री को धोने के बाद, रेडियोधर्मी रूप से लेबल संयुग्म जोड़ते हैं, जो विशेष रूप से एंटीबॉडी (एलिसा के रूप में) को बांधता है। परिणामी प्रतिजन-एंटीबॉडी-लेबल संयुग्म परिसर का स्थान एक्स-रे फिल्म का उपयोग करके ऑटोरैडियोग्राफी द्वारा निर्धारित किया जाता है। इसकी अभिव्यक्ति के बाद, सब कुछ स्पष्ट हो जाता है कि क्या रक्त में एंटीजन हैं या नहीं।

इम्युनोब्लॉट क्या है? यह मानव वायरल संक्रमणों की प्रयोगशाला निदान के लिए एक आम तरीका है। उन्हें एचआईवी की उपस्थिति का पता लगाने के लिए सबसे सटीक और विश्वसनीय तरीकों में से एक माना जाता है। इसकी विश्वसनीयता में, यह एंजाइम-लिंक्ड इम्यूनोसॉर्बेंट परख (एलिसा) से भी आगे निकल जाता है। इम्यूनोब्लॉट परिणाम निर्णायक और अंतिम माना जाता है।

सामान्य जानकारी

इम्युनोब्लॉट - यह क्या है? किसी व्यक्ति के एचआईवी संक्रमण को पहचानने के लिए, एंटीबॉडी की उपस्थिति के लिए रक्त सीरम की प्रयोगशाला परीक्षण की एक विधि से गुजरना आवश्यक है। इम्युनोब्लॉटिंग की विधि को वेस्टर्न ब्लॉट (पश्चिमी धब्बा) भी कहा जाता है। यह एक अतिरिक्त विशेषज्ञ विधि के रूप में मानव वायरल संक्रमण का पता लगाने के लिए उपयोग किया जाता है। एलिसा की पुष्टि करना आवश्यक है, एक प्रयोगशाला परीक्षण जो आपको रक्त में एचआईवी एंटीबॉडी की उपस्थिति निर्धारित करने की अनुमति देता है। इम्यूनोब्लोटिंग ने एक सकारात्मक एलिसा की जांच की। इसे सबसे संवेदनशील, जटिल और महंगा माना जाता है।

भाग्य

इम्युनोब्लॉट क्या है? यह वायरस को एंटीबॉडी की उपस्थिति के लिए एक रक्त सीरम परीक्षण है। अध्ययन के दौरान, विशेषज्ञ पहले जेल में वायरस प्रोटीन को अलग करता है और उन्हें नाइट्रोसेल्यूलोज झिल्ली में स्थानांतरित करता है। एक इम्युनोब्लॉट दिनचर्या को विभिन्न चरणों में एचआईवी का निर्धारण करने के लिए डिज़ाइन किया गया है। पहले चरण में, घटकों से शुद्ध वायरस को वैद्युतकणसंचलन के अधीन किया जाता है, और इसकी संरचना में शामिल एंटीजन को आणविक भार द्वारा अलग किया जाता है।

मानव इम्युनोडेफिशिएंसी वायरस एक जीवित कोशिका में गुणा करता है, इसकी आनुवंशिक जानकारी को इसमें एकीकृत करता है। इस स्तर पर, व्यक्ति संक्रमित होने पर एचआईवी वायरस का वाहक बन जाता है। रोग की ख़ासियत यह है कि लंबे समय तक यह किसी भी तरह से प्रकट नहीं हो सकता है। वायरस लिम्फोसाइटों को नष्ट कर देता है, इसलिए, मानव प्रतिरक्षा कम हो जाती है, और शरीर संक्रमणों का विरोध करने में असमर्थ हो जाता है। यदि एचआईवी सही ढंग से और समय पर इलाज किया जाता है, तो रोगी बहुत बुढ़ापे तक जीवित रहेगा। चिकित्सा की कमी अनिवार्य रूप से मौत का कारण होगी। संक्रमण के क्षण से, लेकिन उपचार के बिना, अधिकतम जीवनकाल दस वर्षों से अधिक नहीं है।

विशेषताएं

इम्युनोब्लॉट विश्लेषण एक विश्वसनीय तरीका है जो आपको पहले और दूसरे प्रकार के एचआईवी एंटीजन के लिए एंटीबॉडी की उपस्थिति निर्धारित करने की अनुमति देता है। यदि कोई व्यक्ति संक्रमित है, तो एंटीबॉडी दो सप्ताह के भीतर दिखाई देती हैं, जिसे बाद में पता लगाया जा सकता है। एचआईवी की ख़ासियत यह है कि एंटीबॉडी की मात्रा तेजी से बढ़ती है और रोगी के रक्त में बनी रहती है। यहां तक \u200b\u200bकि अगर वे मौजूद हैं, तो रोग दो या अधिक वर्षों तक प्रकट नहीं हो सकता है। हमेशा बीमारी की उपस्थिति को सही ढंग से निर्धारित नहीं करता है, इसलिए, एंजाइम-लिंक्ड इम्युनोसोर्बेंट परख ने सकारात्मक परिणाम दिखाया है, तो इम्यूनोब्लॉटिंग और पीसीआर द्वारा परिणामों की पुष्टि आवश्यक है।

नियुक्ति के लिए संकेत

यह "इम्युनोब्लॉट" क्या है यह पहले से ही पता चला है, लेकिन यह अध्ययन किसको सौंपा गया है? इम्युनोब्लॉटिंग की विधि को पारित करने का कारण एक सकारात्मक एलिसा है। यह उन रोगियों के लिए एक एंजाइम-लिंक्ड इम्युनोसॉरबेंट परख से गुजरना आवश्यक है, जिन पर ऑपरेशन किया जाएगा। इसके अलावा, गर्भावस्था की योजना बनाने वाली महिलाओं के लिए एक विश्लेषण किया जाना चाहिए, साथ ही उन सभी के लिए जो एक अनियमित यौन जीवन जीते हैं। यदि एलिसा के परिणाम संदिग्ध हैं, तो एचआईवी वाले रोगियों को इम्युनोब्लॉटिंग असाइन करें। निम्नलिखित खतरनाक लक्षण डॉक्टर से संपर्क करने का कारण हो सकते हैं:

तेज वजन घटाने;
कमजोरी, काम करने की क्षमता का नुकसान;
एक आंत्र परेशान (दस्त) जो तीन सप्ताह तक रहता है;
शरीर का निर्जलीकरण;
बुखार;
शरीर में सूजन लिम्फ नोड्स;
कैंडिडिआसिस, तपेदिक, निमोनिया, टॉक्सोप्लाज्मोसिस, हरपीज का विकास।

रोगी को आत्मसमर्पण करने से पहले तैयारी करने की आवश्यकता नहीं है शिरापरक रक्त। अध्ययन से 8-10 घंटे पहले, आप खाना नहीं खा सकते हैं। रक्त देने से एक दिन पहले मादक और कॉफी पीने की सिफारिश नहीं की जाती है, भारी शारीरिक व्यायाम करते हैं, और उत्साह का अनुभव करते हैं।

विश्लेषण कहां करें?

मुझे एचआईवी परीक्षण कहां मिल सकता है? एलिसा, इम्युनोब्लॉट अध्ययन शहरी निजी क्लीनिक में किए जाते हैं, परिणाम एक दिन के भीतर जारी किए जाते हैं। तत्काल निदान भी संभव है। रूसी संघ के कानून के अनुसार, राज्य चिकित्सा संस्थानों में, एलिसा और इम्युनोब्लॉटिंग नि: शुल्क हैं। संक्रामक रोगों के लिए अनिवार्य परीक्षण गर्भवती महिलाएं हैं, साथ ही ऐसे मरीज जो अस्पताल में भर्ती या शल्य चिकित्सा के लिए जा रहे हैं।

अध्ययन कैसे किया जाता है?

कैसे किया जाता है एलिसा? इम्युनोब्लॉट पॉजिटिव / निगेटिव एंजाइम के परिणाम की पुष्टि करता है या उसका खंडन करता है। शोध प्रक्रिया काफी सरल है। विशेषज्ञ शिरापरक रक्त एकत्र करता है, समय में पांच मिनट से अधिक नहीं लगता है। नमूना लेने के बाद, इंजेक्शन साइट को एक बैंड-सहायता से कीटाणुरहित और सील किया जाना चाहिए। बाड़ को खाली पेट पर किया जाता है, इसलिए प्रक्रिया के बाद यह डार्क चॉकलेट खाने या एक मीठा गर्म पेय पीने के लिए चोट नहीं पहुंचाएगा।

ताकि दिशा निर्देश मिल सके मुफ्त विश्लेषण एक सार्वजनिक स्वास्थ्य सुविधा में, आपको एक सामान्य चिकित्सक से मिलना चाहिए। सामान्य तौर पर, इम्युनोब्लॉट नमूना लेने की विधि से अन्य रक्त परीक्षणों से अलग नहीं है। अनुसंधान तकनीक सरल है। यदि मानव रक्त में एक वायरस मौजूद है, तो शरीर इसे नष्ट करने के लिए एंटीबॉडी का उत्पादन करना शुरू कर देता है। प्रत्येक वायरस में प्रोटीन एंटीजन का अपना सेट होता है। इन एंटीबॉडी का पता लगाना इम्यूनोब्लॉटिंग की विधि का आधार है।

की लागत

विश्लेषण कितना है? एचआईवी इम्युनोब्लॉट एक सस्ता अध्ययन नहीं है। औसतन, एंजाइम इम्युनोसे के तरीकों द्वारा एक स्क्रीनिंग परीक्षा की लागत 500 से 900 रूबल तक होती है। इम्युनोब्लॉटिंग एक सत्यापन अध्ययन है, जिसकी लागत तीन से पांच हजार रूबल तक है। अधिक परिष्कृत तरीके बहुत अधिक महंगे हैं। उदाहरण के लिए, आपको लगभग 12,000 रूबल का भुगतान करना होगा।

परिणाम की व्याख्या

एचआईवी संक्रमण के निदान के लिए सबसे आम तरीके एंजाइम से जुड़े इम्यूनोसॉर्बेंट परख और इम्यूनोब्लॉट हैं। उनका उपयोग रक्त सीरम में इम्यूनोडिफीसिअन्सी वायरस के लिए एंटीबॉडी का पता लगाने के लिए किया जाता है। संक्रमण की उपस्थिति आमतौर पर दो परीक्षणों द्वारा पुष्टि की जाती है: स्क्रीनिंग और पुष्टिकर। अध्ययन के परिणामों की व्याख्या एक डॉक्टर द्वारा की जानी चाहिए, वह एक निदान भी करता है और उपचार निर्धारित करता है। यदि इम्युनोब्लॉट सकारात्मक है, तो इसका मतलब है कि मानव शरीर में एक वायरस मौजूद है।

एक सकारात्मक परिणाम स्वतंत्र उपचार के लिए एक अवसर नहीं होना चाहिए, क्योंकि प्रत्येक रोगी की बीमारी की अपनी तस्वीर हो सकती है। गुणात्मक विश्लेषण में स्क्रीनिंग और सत्यापन शामिल है। यदि रोगी में वायरस नहीं है, तो परिणाम "नकारात्मक" इंगित करता है। यदि एक स्क्रीनिंग विधि द्वारा पता लगाया जाता है, तो एक अतिरिक्त सत्यापन अध्ययन किया जाता है। एक इम्युनोब्लॉट एक परख है जो स्क्रीनिंग की पुष्टि करता है या उसका खंडन करता है। यदि कुछ क्षेत्रों (प्रोटीन स्थानीयकरण साइटों) में परीक्षण पट्टी पर गहरे धब्बे दिखाई देते हैं, तो उन्हें एचआईवी का निदान किया जाता है। यदि परिणाम संदेह में हैं, तो विश्लेषण तीन महीने तक किए जाते हैं।

आप इम्यूनोडेफिशिएंसी वायरस से संक्रमण को रोक सकते हैं यदि कुछ नियमों का पालन किया जाता है: आकस्मिक संभोग से बचें, संपर्क के दौरान कंडोम का उपयोग करें, ड्रग्स न लें। यदि गर्भवती महिला में बीमारी का पता चला है, तो उपस्थित चिकित्सक की सिफारिशों का सख्ती से पालन करना महत्वपूर्ण है, वायरस की उपस्थिति के लिए परीक्षाओं से गुजरना न भूलें।