Si ifa es positivo y la inmunotransferencia no está definida. Immunoblot: ¿qué es eso? Inmunotransferencia en el diagnóstico de enfermedades infecciosas.

El suero sanguíneo del paciente se introduce en el pozo de la placa, a las paredes de las cuales se unen proteínas o fragmentos de proteínas del VIH. Estas proteínas interactúan fuertemente con los anticuerpos del VIH, si los hay, en el suero de prueba. A continuación, se une una enzima a cada molécula de anticuerpos contra el VIH "capturados" del suero del paciente, lo que hace que estos anticuerpos sean visibles al cambiar el color de la solución en el pozo: cuantos más anticuerpos haya en el suero, más oscuro será el color en la placa. A partir de este momento, comienza el proceso de confirmar un resultado positivo. En la primera etapa, el estudio de este suero se repite en el mismo sistema de prueba en dos pocillos, lo que elimina los errores técnicos. Si se confirma el resultado, comienza la segunda etapa. El estudio se realiza en otros dos sistemas de prueba ELISA, "descartando" resultados falsos positivos. Si se obtiene un resultado positivo en al menos uno de estos sistemas de prueba, la tercera etapa de la altamente específica método de inmunotransferencia - Una prueba que confirma la presencia de infección por VIH.

Dado que los estudios se llevan a cabo en etapas, el tiempo para obtener el resultado puede ser de 1 a 10 días.

Opciones para los resultados:

"La inmunotransferencia es negativa" - significa que la reacción positiva en las pruebas de ELISA fue falsa o inespecífica, no hay infección por VIH.
"La inmunotransferencia es positiva" - se detectaron anticuerpos contra el VIH en la sangre, se requiere la cuarta y última etapa - muestreo de sangre repetido con un documento de identidad (pasaporte) en el centro contra el SIDA y examen repetido para excluir un error técnico en el muestreo de sangre. Solo después de un resultado positivo en suero repetido se resume el resultado final - "se detectan anticuerpos contra el VIH", en una persona - infección por VIH.
"La inmunotransferencia es dudosa". Esto significa que el suero no reacciona con todos, sino con algunas proteínas individuales del VIH aplicadas a las tiras de nitrocelulosa de la mancha, es decir, solo se detecta una parte de los anticuerpos contra las proteínas del VIH. Un resultado indefinido puede significar que una persona está infectada con el VIH, pero el cuerpo no desarrolla todo el espectro de anticuerpos. A menudo, después de 1-3-6 meses desde el momento de recibir un resultado dudoso, todos los anticuerpos y el VIH aparecen uno tras otro en el suero. En este caso, el dudoso resultado es evidencia de la etapa inicial de la infección por VIH. O, el resultado de una inmunotransferencia indefinida muestra que una persona no está infectada, pero en su cuerpo hay anticuerpos similares a los verdaderos anticuerpos contra el VIH. Tal resultado puede ser en pacientes con tuberculosis, pacientes con cáncer, receptores que reciben múltiples transfusiones de sangre (transfusiones de sangre), en mujeres embarazadas. Con un resultado incierto de IB, el paciente está bajo la supervisión de un especialista en enfermedades infecciosas y repite el análisis.

Al pasar las pruebas en el Centro Khanty-Mansiysk para la Prevención y el Control del SIDA y las Enfermedades Infecciosas, los ciudadanos rusos tienen la oportunidad de hacerse la prueba del VIH de forma anónima y gratuita, para recibir asesoramiento completo de especialistas en enfermedades infecciosas y psicólogos antes y después de pasar la prueba.

Existe una técnica que le permite determinar no los anticuerpos contra el virus del VIH, sino el virus en sí mismo en el cuerpo, esta es la técnica de PCR: reacción en cadena de la polimerasa. Ha demostrado su eficacia y se utiliza para:

determinar la presencia o ausencia de VIH en sí mismo en el "período de ventana", con un resultado poco claro de inmunotransferencia;

para determinar la necesidad de prescribir tratamiento y monitorear el tratamiento;

para determinar el estado del VIH de los recién nacidos de madres infectadas por el VIH.

La PCR le permite determinar una cantidad muy pequeña de partículas virales en el material infectado. La PCR requiere equipos de laboratorio sofisticados y especialistas altamente calificados. El método es muy costoso y en las pruebas masivas de VIH, que, según la ley, se lleva a cabo de forma gratuita para la población, no se aplica.

En situaciones de emergencia (durante el parto, operaciones por razones de salud) aplique "pruebas expresas". Su implementación no requiere equipos sofisticados y personal altamente calificado. El resultado de la prueba rápida debe confirmarse mediante la prueba estándar de VIH.

INMUNOBLOT (Western blot) - método investigación de laboratorio suero sanguíneo para la presencia de anticuerpos contra el VIH; Este es un análisis más preciso que ELISA y se utiliza para confirmar los resultados de ELISA. IFA - inmunoensayo enzimático (ELISA) prueba de laboratorio para determinar la presencia de anticuerpos contra el VIH en la sangre; Prueba de anticuerpos contra el VIH.

Por recomendación de la OMS, la inmunotransferencia (western blot) se utiliza en el diagnóstico de infección por VIH como un método experto adicional que debería confirmar los resultados de ELISA. Por lo general, este método verificará dos veces un resultado positivo con ELISA, ya que se considera más sensible y específico, aunque más complejo y costoso.

La inmunotransferencia combina el ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA) con una separación electroforética preliminar de proteínas virales en un gel y su transferencia a una membrana de nitrocelulosa. El procedimiento de inmunotransferencia consta de varias etapas (). Primero, el VIH prepurificado y destruido en sus componentes constituyentes se somete a electroforesis, mientras que todos los antígenos que forman el virus están separados por peso molecular. Luego, por transferencia, los antígenos se transfieren del gel a una tira de nitrocelulosa o un filtro de nylon, que a partir de ahora contiene un espectro de proteínas que no es visible para el ojo, lo cual es típico del VIH. Luego, el material de prueba se aplica a la tira (suero, plasma sanguíneo del paciente, etc.), y si hay anticuerpos específicos en la muestra, se unen a tiras de proteínas antigénicas que se corresponden estrictamente con ellas. Como resultado de manipulaciones posteriores (como ELISA), el resultado de esta interacción se visualiza, se hace visible. La presencia de bandas en ciertas secciones de la tira confirma la presencia de anticuerpos contra antígenos de VIH estrictamente definidos en el suero estudiado.

La inmunotransferencia se usa con mayor frecuencia para confirmar el diagnóstico de infección por VIH. La OMS considera sueros positivos en los que los anticuerpos se detectan mediante el método de inmunotransferencia contra dos proteínas de la envoltura del VIH. Según estas recomendaciones, si hay una reacción con solo una de las proteínas de la envoltura (gp160, gp120, gp41) en combinación o sin reacción con otras proteínas, el resultado se considera dudoso y se recomienda un nuevo examen utilizando un kit de otra serie o de otra compañía. Si incluso después de esto el resultado sigue siendo dudoso, los estudios continúan cada 3 meses.

Para la inmunotransferencia en la primera etapa, las proteínas contenidas en el suero sanguíneo se separan en un gel de acuerdo con su peso molecular y se cargan usando un campo eléctrico (electroforesis en gel). Luego, se aplica una membrana de nitrocelulosa o nylon al gel y se “se seca” (esto es secar). Esto se lleva a cabo en una cámara especial, que permite la transferencia completa de material del gel a la membrana. Como resultado, esa imagen de la ubicación de las proteínas que estaban en el gel se reproduce en la membrana (mancha), que luego se puede manipular fácilmente. Inicialmente, la membrana se trata con anticuerpos contra el antígeno deseado, y después de lavar el material no unido, se agrega un conjugado marcado radiactivamente que se une específicamente a los anticuerpos (como en ELISA). La ubicación del complejo conjugado marcado con antígeno-anticuerpo resultante se determina mediante autorradiografía usando una película de rayos X. Después de su manifestación, todo queda claro si hay antígenos en la sangre o no.

¿Qué es una inmunotransferencia? Este es un método común para el diagnóstico de laboratorio de infecciones virales humanas. Se le considera una de las formas más precisas y confiables para detectar la presencia del VIH. En su fiabilidad, supera incluso el ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA). Los resultados de inmunotransferencia se consideran concluyentes y finales.

Información general

Immunoblot: ¿qué es eso? Para reconocer la infección por VIH de una persona, es necesario someterse a un método de análisis de laboratorio de suero sanguíneo para detectar la presencia de anticuerpos. El método de inmunotransferencia también se denomina western blot (western blot). Se utiliza para detectar infecciones virales humanas como un método experto adicional. Es necesario confirmar ELISA, una prueba de laboratorio que le permite determinar la presencia de anticuerpos contra el VIH en la sangre. La inmunotransferencia volvió a comprobar un ELISA positivo. Se considera el más sensible, complejo y costoso.

Destino

¿Qué es una inmunotransferencia? Esta es una técnica de suero para la presencia de anticuerpos contra el virus. Durante el estudio, el especialista separa previamente las proteínas del virus en el gel y las transfiere a la membrana de nitrocelulosa. Una rutina de inmunotransferencia está diseñada para determinar el VIH en diferentes etapas. En la primera etapa, el virus purificado de los componentes se somete a electroforesis y los antígenos incluidos en su composición se separan por peso molecular.

El virus de inmunodeficiencia humana se multiplica en una célula viva, integrando su información genética en ella. En esta etapa, la persona se convierte en portadora del virus del VIH si ha sido infectado. La especificidad de la enfermedad es que durante mucho tiempo puede no manifestarse de ninguna manera. El virus destruye los linfocitos, por lo tanto, la inmunidad humana se reduce y el cuerpo no puede resistir las infecciones. Si el VIH se trata de manera correcta y oportuna, el paciente vivirá hasta una edad muy avanzada. La falta de terapia inevitablemente conducirá a la muerte. Desde el momento de la infección, pero sin tratamiento, la vida útil máxima no es más de diez años.

Caracteristicas

El análisis de inmunotransferencia es un método confiable que le permite determinar la presencia de anticuerpos contra los antígenos del VIH del primer y segundo tipo. Si una persona está infectada, aparecen anticuerpos dentro de dos semanas, que pueden detectarse mucho más tarde. La peculiaridad del VIH es que la cantidad de anticuerpos aumenta rápidamente y permanece en la sangre del paciente. Incluso si están presentes, la enfermedad puede no manifestarse por dos o más años. no siempre determina con precisión la presencia de la enfermedad, por lo tanto, se requiere la confirmación de los resultados mediante inmunotransferencia y PCR si el ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas ha mostrado un resultado positivo.

Indicaciones de cita

¿Qué es esta "inmunotransferencia" ya descubierta, pero a quién se asigna este estudio? La razón para pasar el método de inmunotransferencia es un ELISA positivo. Es necesario pasar por un ensayo inmunosorbente ligado a enzimas para pacientes que serán operados. Además, se debe hacer un análisis para las mujeres que planean un embarazo, así como para todas las personas que llevan una vida sexual errática. Asigne inmunotransferencia a pacientes con VIH si los resultados de ELISA son cuestionables. Los siguientes síntomas alarmantes pueden ser la razón para contactar a un médico:

pérdida de peso aguda;
debilidad, pérdida de capacidad de trabajo;
un malestar intestinal (diarrea) que dura tres semanas;
deshidratación del cuerpo;
fiebre
ganglios linfáticos inflamados en el cuerpo;
el desarrollo de candidiasis, tuberculosis, neumonía, toxoplasmosis, exacerbación del herpes.

El paciente no necesita prepararse antes de rendirse sangre venosa. 8-10 horas antes del estudio, no puede comer alimentos. No se recomienda tomar bebidas alcohólicas y de café un día antes de donar sangre, hacer ejercicios físicos pesados \u200b\u200by experimentar emoción.

¿Dónde hacer el análisis?

¿Dónde puedo hacerme una prueba de VIH? ELISA, los estudios de inmunotransferencia se llevan a cabo en clínicas privadas urbanas, los resultados se emiten en un día. Un diagnóstico urgente también es posible. En las instituciones médicas estatales, ELISA e inmunotransferencia son gratuitos, de acuerdo con la legislación de la Federación de Rusia. Las pruebas obligatorias para enfermedades infecciosas son mujeres embarazadas, así como pacientes que van a hospitalización o cirugía.

¿Cómo se realiza el estudio?

¿Cómo se realiza ELISA? Immunoblot positivo / negativo confirma o refuta los resultados del inmunoensayo enzimático. El procedimiento de investigación es bastante simple. El especialista recolecta sangre venosa, a tiempo no toma más de cinco minutos. Después del muestreo, el sitio de inyección debe desinfectarse y sellarse con una tirita. La cerca se lleva a cabo con el estómago vacío, por lo que después del procedimiento no está de más comer una barra de chocolate negro o beber una bebida caliente dulce.

Para obtener indicaciones para análisis libre en un centro de salud pública, debe visitar a un médico general. En general, la inmunotransferencia no es diferente de otros análisis de sangre por el método de muestreo. La técnica de investigación es simple. Si hay un virus presente en la sangre humana, el cuerpo comienza a producir anticuerpos para destruirlo. Cada virus tiene su propio conjunto de antígenos proteicos. La detección de estos anticuerpos es la base del método de inmunotransferencia.

Costo

¿Cuánto cuesta el análisis? Una inmunotransferencia de VIH no es un estudio barato. En promedio, una prueba de detección por métodos de inmunoensayo enzimático cuesta de 500 a 900 rublos. La inmunotransferencia es un estudio de verificación, cuyo costo es de tres a cinco mil rublos. Los métodos más sofisticados son mucho más caros. Por ejemplo, deberá pagar unos 12,000 rublos.

Interpretación del resultado.

Los métodos más comunes para diagnosticar la infección por VIH son el ensayo de inmunoabsorción ligado a enzimas y la inmunotransferencia. Se usan para detectar anticuerpos contra el virus de inmunodeficiencia en el suero sanguíneo. La presencia de infección generalmente se confirma mediante dos pruebas: detección y confirmación. La interpretación de los resultados del estudio debe ser realizada por un médico, él también hace un diagnóstico y prescribe el tratamiento. Si la inmunotransferencia es positiva, significa que hay un virus presente en el cuerpo humano.

Un resultado positivo no debe ser una ocasión para un tratamiento independiente, ya que cada paciente puede tener su propia imagen de la enfermedad. El análisis cualitativo incluye el cribado y la verificación. Si el paciente no tiene un virus, el resultado indica "negativo". Si se detecta mediante un método de detección, se realiza un estudio de verificación adicional. Una inmunotransferencia es un ensayo que confirma o rechaza la detección. Si aparecen manchas oscuras en la tira reactiva en ciertas áreas (sitios de localización de proteínas), se les diagnostica el VIH. Si los resultados están en duda, las pruebas se llevan a cabo durante tres meses.

Puede prevenir la infección con el virus de inmunodeficiencia si se siguen ciertas reglas: evite las relaciones sexuales accidentales, use un condón durante el contacto, no tome drogas. Si la enfermedad se detecta en una mujer embarazada, es importante seguir estrictamente las recomendaciones del médico tratante, no olvide someterse a exámenes para detectar la presencia del virus.